膜再生液(一抗二抗去除液)

膜再生液有些公司叫做一抗二抗去除液，用于对同一张膜进行多次 Western Blot检测。

在室温条件下，将用过的膜浸泡在膜再生液
30-60分钟，可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后，可以使用不同的抗体
进行下一轮 Western Blot实验，因而可利用同一张膜进行多次蛋白检测。适宜从少量样品多次
检测多种不同蛋白质。即使样品量并不匮乏，采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白，能省去
给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。
本产品特点是：无毒无害，室温下使用，室温下保存；可对同一张膜进行 10次以上的
Western Blot检测。 适用于清除硝酸纤维素膜或 PVDF 膜上结合的抗体，不影响抗原蛋白。

1、膜再生的实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下，将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。有许多因素影响抗体从膜洗脱，如膜类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性。按下面的说明优化再生液中孵育膜的时间至关重要。
2、确定膜上抗体是否去除与优化再生液孵育膜的时间：用 ECL 荧光工作液孵育再生后的膜约 1
分钟，然后进行 X光胶片曝光并显影，可确定膜上的抗体是否完全去除。如胶片上显示条带，表
明抗体未完全去除，应继续将膜浸泡在再生液中另外孵育 30-60 分钟。然后再次 ECL 检查膜上抗
体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳孵育时间。
3、由于至今尚不清楚的原因，使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用 BSA封闭的膜上的抗体更容易被
洗下来。因此准备进行再生的膜，应该使用脱脂奶粉而不是 BSA封闭。
4、尽量避免使用干燥保存的膜，干的膜上的抗体很难被洗干净。